Coombsov test

Kaj je Coombsov test?

Coombsov test se uporablja za odkrivanje protiteles proti rdečim krvničkam (eritrocitom). Za določanje protiteles se uporablja tako imenovani Coombsov serum, ki ga dobimo iz seruma kuncev in je občutljiv na človeška protitelesa.
Test se uporablja, če obstaja sum na hemolitično anemijo, nezdružljivost rezusa ali tik pred transfuzijo krvi. Hemolitična anemija je oblika anemije, rezusna nezdružljivost pa opisuje nezdružljivost krvne skupine.
Obstajata dve različni vrsti Coombsovega testa, neposredni in posredni test se razlikujeta glede na indikacijo in izvedbo.

Razlogi za Coombsov test

Neposredni Coombsov test se uporablja pri sumu na hemolitično anemijo. Hemolitična anemija opisuje anemijo, pri kateri se krvne celice zaradi poškodbe prezgodaj razgradijo.
Pri avtoimunskih boleznih, kot so sistemski eritematozni lupus, revmatoidni artritis ali kronična limfocitna levkemija, nastajajo protitelesa, ki so usmerjena proti lastnim krvnim celicam telesa (tako imenovani eritrociti). Vezava protiteles vodi v zgodnji razpad krvnih celic ali do strjevanja krvnih celic v žilah. Oboje vodi v padec vrednosti hemoglobina.

Druga indikacija neposrednega Coombsovega testa je bolezen hemolyticus neonatorum, pri čemer se v telesu mati-negativne matere tvorijo protitelesa proti rezus-faktorju. Če je nerojeni otrok pozitiven na rezus, lahko protitelesa iz materine vstopijo v plodni obtok in tam sprožijo povečan razpad krvnih celic. Novorojenčki izstopajo s hudo anemijo in zlatenico.

Coombsov test se redno uporablja v transfuzijski medicini. Uporablja se za določanje krvnih skupin pred transfuzijo krvi (posteljni test), pri kateri se majhen vzorec krvi pomeša z različnimi serumi iz krvnih skupin A, B, AB in 0. Če kri ostane tekoča, je bolnikova kri združljiva z ustrezno krvno skupino. Transfuzija se lahko izvede.

Posredni Coombsov test lahko uporabimo tudi za iskanje prostih protiteles v bolnikovem telesu (test iskanja protiteles), npr. med pregledom materinstva pri pripravi na transfuzijo za onkološke bolnike ali ljudi, ki so že prejeli transfuzijo krvi.

Poiščite vse o temi tukaj: Rh nestrpnosti

Priprava

V pripravi na Coombsov test se najprej pripravijo serumi s protitelesi, ki jih je treba testirati. Napolnijo jih v različne epruvete ali nanesejo na testne kartice.

V vsakdanji klinični praksi npr. s posteljnim testom so že pripravljene testne karte, ki jih je mogoče takoj uporabiti. Nato se bolniku odvzame kri in pripravi na test. Glede na to, za katero vrsto Coombsovega testa opravimo, potrebujemo krvne celice ali serum (tekoči del krvi) pacienta.

Zaporedje

Če se izvede neposredni Coombsov test, se rdeče krvne celice filtrirajo iz pacientove krvi. Preveriti je treba, ali na njih obstajajo protitelesa tipa IgG, ki v telesu povzročajo hemolitično anemijo ali nezdružljivost krvnih skupin. Coombsov serum vsebuje protitelesa proti človeškim protitelesom IgG. Zmes segreva (inkubira) dlje časa. Če na rdečih krvnih celicah obstajajo protitelesa, se strdijo in test postane pozitiven.

Posredni Coombsov test je sestavljen iz dveh delov. Cilj je določiti protitelesa, ki so prosta v krvi in ​​niso vezana na krvne celice.
Tokrat se tekoči del (serum) filtrira iz pacientove krvi. Najprej se v serum za test dodajo rdeče krvne celice. Če so v serumu prosta protitelesa, se ta vežejo na rdeče krvne celice. Ta reakcija ni vidna. Šele v drugem koraku je, tako kot pri neposrednem Coombsovem testu, dodan in ogrevan Coombsov serum s protitelesi proti človeškim protitelesom. Tudi tukaj se rešitev strdi, če je rezultat pozitiven.

Ocena

Če protitelesa kombiniramo s primernim serumom Cooms, se protitelesa v serumu (tekoči del krvi) vežejo s pacientovimi protitelesi. Protitelesa so v obliki črke Y, kar pomeni, da lahko vedno vežejo dva vezna partnerja in tako medsebojno navzkrižno povezujejo rdeče krvne celice. Nastane veliko kopičenje krvnih celic. Te grude postanejo vidne - kri se aglutinira (grudice) in test je pozitiven.
Če bolnik nima ustreznih protiteles, ostane serum tekoč. Ne vidite sprememb - test je negativen.

Kakšne so druge možnosti?

Alternativa Coombsovemu testu je imunološka metoda ELISA (z encimom povezana imunosubenska analiza), pri kateri so določena protitelesa označena z encimom. To protitelo dodamo preskusni raztopini. Če označena protitelesa reagirajo s protitelesi v preskusni raztopini, se vezani encim aktivira in ustvari barvilo. Ustrezne epruvete spremenijo barvo - test je pozitiven.

Poleg postopka ELISA obstaja tudi blok WESTERN, ki se pogosto uporablja kot potrditveni test za pozitivno ELISA.